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第九屆長春國際電影節(jié)最佳女主角
第一屆亞洲彩虹獎(jiǎng)最佳女喜劇演員
第12屆金鳳凰獎(jiǎng)表演學(xué)會(huì)獎(jiǎng)
第二屆華鼎獎(jiǎng)年度影視最佳女演員
2006年星光大典最受歡迎四大花旦

15歲時(shí)參加上海電視臺(tái)的綜藝舞蹈隊(duì)，正式自食其力自己賺取學(xué)費(fèi)。

1993年，被選中主演電影《劉海粟》，那是她的第一次觸電經(jīng)歷，收獲800元片酬。1994年，考入上海戲劇學(xué)院94級(jí)表演系本科。

1996年，與保劍峰、陳龍、高曙光、張雅琳共同出演了電視劇《真空愛情記錄》，講述了一群大學(xué)畢業(yè)生為了工作和愛情奮斗的故事。

1998年，畢業(yè)于上海戲劇學(xué)院，畢業(yè)后參演了第一部改編自陜西駐滬作家李春平同名小說的電影《玻璃是透明的》，馬伊琍飾演“小丫子”，同年出演的第一部古裝電影《孔乙己》至今沒有公映。

2000年，出演了《黑洞》飾演演三陪女，馬伊琍的表演事業(yè)得到了更好的提升，在電視劇《前世今生》中飾演美貌且氣質(zhì)超凡的秦婉瑩。

2001年，出演電視劇《白天睡覺的女人》飾演李秀，在電影《西施眼》中飾演施雨，該劇在2002年美國夏威夷國際電影節(jié)中獲評(píng)審團(tuán)大將及亞洲最佳電影。2002年，因出演電視劇《還珠格格Ⅲ之天上人間》中紫薇一角而被大眾所熟知。2004年，出演了由黃磊指導(dǎo)的《天一生水》飾演一個(gè)混血姑娘明妮。

2005年，出演張黎導(dǎo)演的電視劇《錦衣衛(wèi)》在劇中就出演了一個(gè)這樣的傾國美人客印月。

2006年，參演《喬家大院》扮演的“江雪瑛”，2007年，出演由趙寶剛指導(dǎo)的青春勵(lì)志電視劇《奮斗》而知名度得到進(jìn)一步的提升。

2008年，因拍電視劇《為誰心動(dòng)》時(shí)無悔剃光了頭，憑借影片《江北好人》，馬伊琍戰(zhàn)勝了李冰冰、范冰冰兩位大熱候選人，成為了長春電影節(jié)影后。

2009年，與佟大為共同出演了電視劇《婚姻保衛(wèi)戰(zhàn)》演出夫妻間事。同年馬伊琍出演了首部反映豫商故事的電視劇《經(jīng)緯天地》在CCTV-8播出，這也是她繼《喬家大院》之后首次登陸央視，馬伊琍扮演尚達(dá)志的妻子順兒，這也是馬伊琍生產(chǎn)復(fù)出首部電視劇作品。

2010年，與涂松巖領(lǐng)銜主演的都市題材電視劇《雙城生活》反映了“雙城戀”話題，讓許多觀眾產(chǎn)生了不小共鳴并引發(fā)了網(wǎng)絡(luò)熱議，而馬伊琍在劇中飾演北京大妞郝京妮。憑借該劇獲得國劇盛典2011年度最佳女演員。

2013年，年初馬伊琍與杜淳、劉莉莉、陳思斯等眾多明星合作的電視劇《青春期撞上更年期Ⅱ》，此外，還客串電影《不二神探》，并且徹底顛覆以往的形象。

2013年，首當(dāng)制片人的馬伊琍與首次當(dāng)導(dǎo)演的丈夫文章合作的電視劇《小爸爸》。